石蜡切片详细步骤

 
1.仪器
 
石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻
片、盖玻片等。
 
2. 试剂
 
FAA固定液
(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
 
3.取材
 
幼嫩的油菜植株叶片和茎
 
4.方法与步骤(参照) 
1．固定：FAA固定液固定48小时以上。
 
2．脱水：
 
50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5h。其中70%酒精处可长期保存。
 
3．透明：
 1/2二甲苯+1/2无水乙醇(2h) →纯二甲苯(1.5h) →纯二甲苯(1.5h) 

4．浸蜡：
 将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中，40℃烘箱敞口过夜。
 
5．包埋：
 先提升恒温箱的温度至60℃，换纯蜡3次，每次1-2h，用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45-60℃的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签（正面向外置于底部），补足
石蜡，倒好后轻轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过夜。
 
6．切片
 对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。
切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并迅速将石蜡块四周的碎屑烫
平，使石蜡块牢固地粘在台木上。检查切片机，安装切片刀、调整好刀的角度，调整石蜡
块与刀口之间的角度与位置后开始切片。
 
7．粘片
 
将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，
材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上
编号，放入温箱中烘干，温度30～40℃中过夜。
 
8．脱蜡
  脱蜡用二甲苯，把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中：纯二甲苯(10-20min)→纯二甲苯(5-10min) 

9．染色
 
将纯二甲苯脱蜡完全的材料，1/2 二甲苯十1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→70％酒精→50％酒精→1%番红染色(4h以上) →50％酒精→70％酒精→85％酒精→95％酒精→0.5%固绿(1min)→95％酒→100
酒精→100％酒精(未注明时间各级均为3min)  

10．胶封
 
滴加加拿大树胶封藏。
 
11.

镜检，拍照

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