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HE染色在临床病理诊断中的应用(八)
实验步骤:
一、切片预处理
1.二甲苯中37℃脱蜡2次,15min/次。
2.无水乙醇浸泡2次,每次3min。
3.95%乙醇浸泡2次,每次3min。
4.PBS浸泡一次,3min。
5.2%DEPC水室温下浸泡10min。
6.PBS浸泡10min。
7.0.2mol/L HCl浸泡30min。
8.PBS浸泡2次,每次3min。
9.滴加蛋白酶K(15ug/ml),37℃孵育15min。
10.0.1%甘氨酸处理5min。
11.4%多聚甲醛再次固定10min。
12.PBS清洗2次,每次5min。
13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。
14.SSC清洗2次,每次5min。

滴加预杂交液,上面盖封口膜,使预杂交液不会干掉,随后放入湿盒,40℃孵育1-2h。

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