HE染色在临床病理诊断中的应用(八）
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2018-02-09
实验步骤：
一、切片预处理
1.二甲苯中37℃脱蜡2次，15min/次。
2.无水乙醇浸泡2次，每次3min。
3.95%乙醇浸泡2次，每次3min。
4.PBS浸泡一次，3min。
5.2%DEPC水室温下浸泡10min。
6.PBS浸泡10min。
7.0.2mol/L HCl浸泡30min。
8.PBS浸泡2次，每次3min。
9.滴加蛋白酶K（15ug/ml），37℃孵育15min。
10.0.1%甘氨酸处理5min。
11.4%多聚甲醛再次固定10min。
12.PBS清洗2次，每次5min。
13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。
14.SSC清洗2次，每次5min。
一、切片预处理
1.二甲苯中37℃脱蜡2次，15min/次。
2.无水乙醇浸泡2次，每次3min。
3.95%乙醇浸泡2次，每次3min。
4.PBS浸泡一次，3min。
5.2%DEPC水室温下浸泡10min。
6.PBS浸泡10min。
7.0.2mol/L HCl浸泡30min。
8.PBS浸泡2次，每次3min。
9.滴加蛋白酶K（15ug/ml），37℃孵育15min。
10.0.1%甘氨酸处理5min。
11.4%多聚甲醛再次固定10min。
12.PBS清洗2次，每次5min。
13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。
14.SSC清洗2次，每次5min。
滴加预杂交液，上面盖封口膜，使预杂交液不会干掉，随后放入湿盒，40℃孵育1-2h。
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