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体外SUMO修饰实验二

1、感受态细胞的制备

      (1)准备LB培养基:0.5%酵母浸提物、1%胰蛋白胨、1%NaCl(PH 7.0),高压灭菌,4℃保存备用。

      (2)准备LB琼脂平板:取新鲜配置的100-200mlLB培养基,加入1.5g琼脂糖,高压灭菌,冷却至60℃,液体倒入已消毒的平皿中,凝固后4℃保存备用。

      (3)无菌条件下,用接种环蘸取少量大肠埃希菌DH5aIM109菌液,在不含抗生素的LB琼脂糖平板上划线,37℃过夜培养。

      (4)LB平板上挑取一个单菌落,放入含2mlLB培养基的试管中,37℃恒温摇床220rpm振荡培养过夜。

      (5)500ul菌液,转入含50mlLB培养基的培养瓶中,37℃恒温摇床180rpm振荡培养至OD600=0.8-1.0



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