1、感受态细胞的制备

      （1）准备LB培养基：0.5%酵母浸提物、1%胰蛋白胨、1%NaCl(PH 7.0),高压灭菌，4℃保存备用。

      （2）准备LB琼脂平板：取新鲜配置的100-200ml的LB培养基，加入1.5g琼脂糖，高压灭菌，冷却至60℃，液体倒入已消毒的平皿中，凝固后4℃保存备用。

      （3）无菌条件下，用接种环蘸取少量大肠埃希菌DH5a或IM109菌液，在不含抗生素的LB琼脂糖平板上划线，37℃过夜培养。

      （4）从LB平板上挑取一个单菌落，放入含2mlLB培养基的试管中，37℃恒温摇床220rpm振荡培养过夜。

      （5）取500ul菌液，转入含50mlLB培养基的培养瓶中，37℃恒温摇床180rpm振荡培养至OD600=0.8-1.0。

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