15. 14000rpm瞬时离心5s，去上清，收集琼脂糖珠-抗原抗体的复合物。

      16. 用800ul预冷RIPA buffer冲洗3遍。

      17. 用60ul 2倍上样缓冲液将琼脂糖珠-抗原抗体复合物悬起，轻轻敲打混匀。

      18. 将上样样品煮5min。

      19. 14000g离心，收集剩余琼脂糖珠。

      20. 将上清电泳，电泳前应再次煮5min变性。

      上清也可以暂时冻-20℃，留待以后电泳。

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