原核表达经验谈
人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的，1828年，德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物活性的蛋白质
【资源】蛋白质相关实验技术操作指南（20021108经典巨献）
★☆★★☆★★☆蛋白质相关实验技术操作全攻略★☆★★☆★★☆ 1、Western blotting: Western blotting using ECL reagent used by：Laboratory of P.J. Hansen,Dept. of Animal Sciences, University of Florida Kamps's
脂肪氧化酶活性测定
植物材料，从叶片中提取粗蛋白，0.5g叶片使用液氮研磨，加入到4ml冰预冷提取缓冲液（0.05mol/L PH6.4 磷酸钠缓冲液，1mmol/L EDTA，1%PVP，1mmol/LDTT）中，12，000g，4℃离心10min，取上清进行脂
核糖体失活展示系统
介绍 在过去的 10 年里，几种展示系统为多肽和蛋白质的选择及进化提供了强大而高效的技术。在这些技术中，将基因型和表现型相联系是最关键的决定因素。在这样的选择系统里，文
原核表达
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特
醋酸纤维素薄膜电泳简介
醋酸纤维薄膜电泳（cellulose acetate membrance electrophoresis）以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维素的醋酸酯，由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮等有机溶液中，即可涂布成均一细
实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品 RNA 的抽提 ①取冻存已裂解的细胞，室温放置 5 分钟使其完全溶解。 ②两相分离 每 1ml 的 TRIZOL 试剂裂解的样品中加入 0.2ml 的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体 15 秒后， 15 到
蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB ）
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RN
双向电泳操作步骤
水化上样( 被动上样) 1. 从冰箱中取出 IPG 胶条，室温放置 10min。 2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品，槽两端各 1cm 左右不加样，中间的样品液一定要连贯。注意：不要产生气泡
蛋白质纯化胶体过滤法
不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱，可依其分子量差异分离；是一种广泛应用的partition色析法 （Pharmacia操作手册， Gel Filtration）。 仪器设备 色析管柱 （Pharmacia C column, 1.6×100
