一个良好的抗原必须具体的条件：
（1）分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说，一个抗原决定簇（又叫表位，epitope），通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位，因此分子太小的多肽或蛋白是很难有一个表位的。
（2）外源性强。在个体形成的早期就对自身物质形成了免疫耐受，因此如果和机体内的物质完全一样或者是相似就很难引起机体的免疫应答。如果是利用免疫赦免区的成份（如大脑、眼球、睾丸内部成份）则不必考虑外源性。
（3）结构尽量复杂。简单重复的物质是不具有免疫原性的
（4）可降解性好。常用的抗原大致分为以下几类：
1.1纯化的天然蛋白质
天然的蛋白存在修饰，且结构相对说比较复杂（除了线性表位还有结构表位），所以它是很好的抗原。但是天然的蛋白很难达到较高的纯度，这给免疫和后面的纯化带来了不少麻烦，而且只适合在机体细胞内表达量比较高的蛋白。
1.2.纯化的重组蛋白
相对于天然蛋白来说，重组蛋白比较容易获得得较高的纯度，而且也比较方便鉴定。值得注意的是重组蛋白为了纯化的方便，通常需要带一段标签（如GST、6*His、Myc、MBP、Flag、Fc等)，在免疫中动物体通常会产生这些标签的抗体，在后面的纯化过程中需要去掉这些标签的抗体。
1.3. 人工合成多肽
很多蛋白属于家族蛋白，而这些家族内的蛋白相似度都很高，而且不同物种之间这些家族蛋白也具有很高的同源性。此时如果用对应的天然蛋白或者重组蛋白免疫动物往往不能产生出抗体，或者生产的抗体可以同时识别这三种肌动蛋白，此时最好的解决办法就是人工合成它们之间不相同的区域作为抗原进行免疫。
1.4. 小分子物质
主要是小分子药物，分子量一般不超过1000Da，分子量小于300Da的分子很难获得高亲和力的抗体。含有芳香环的小分子更容易引起免疫反应，但是和人工和成的肽一样，小分子药物也属于半抗原，也需要连接载体才能够进行免疫动物。
1.5. 组织、全细胞或细胞组分
当我们不清楚自己需要的抗原，比如说想制备出肿瘤特异性抗原的抗体的时候，往往需要以组织、全细胞或者细胞组分作为抗原进行动物免疫。如果以组织作为抗原，则需要切除新鲜的组织，用生理盐水洗干净，然后用滤网和研杵将其分离成单个细胞。
一般对需要制备单抗的抗原纯度要求不高，当然越高越好。抗原纯度越高，得到符合要求的阳性细胞的几率越大，因为高纯度的抗原刺激机体产生特异性B细胞的几率较大。但对于来源有限、保存过程中容易失活、纯化困难、本身免疫原性很强、所需抗体用途要求不高等的抗原可以简单提纯或不提纯，可以在筛选阶段多下功夫就可以达到。
免疫动物的选择
根据不同项目的需求，通常选择以下实验动物：
2.1 Balb/c小鼠，雌性6-8周龄，体重16-22g
2.2 SD大鼠，雌性6-8周龄，体重100-150g
实验动物进入动物房后，需经过三天的检疫期，检疫期结束后，对健康的动物进行称重标记，并登记进数据库，根据免疫方案的要求，选择合适品系的动物，随机并入笼中，编组。
免疫程序免疫开始之前，应考虑到项目需求，制备合适的抗原，根据抗原的性质和纯度、抗原量、免疫途径、免疫次数与间隔时间、佐剂的应用及动物对该抗原的应答能力等因素的影响，设计一个合理的免疫程序。
3.1 采用多点注射的方法免疫动物，通常采用足底注射（Foot Pad, FP）和背部皮下注射（Subcutaneous, SC）配合免疫,为了防止漏药，动物足底每点给药体积不能超过15ul，皮下每点给药体积不超过200ul.足底注射通常使用Alum + CPG + DPBS + 抗原，皮下注射通常使用Titer-Max + CPG + DPBS + 抗原（充分乳化成“油包水”状态）。
3.2 FP免疫流程3.2.1 佩戴防护镜，防止液体键入眼睛。
3.2.2用75%的酒精棉球消毒后，再在后足底面脚趾根部处进针（针斜朝上），插入注射针时要沿着后足底部的外表皮仔细进行，避免碰到位于动物足内侧的静脉，将针头推到接近组根部的位置。（注射针选用1ml的胰岛素注射器，针头28g）。
3.2.3 缓缓注射抗原溶液，体积15-30ul。
3.2.4 注射完后拔出注射针，用干棉球轻按注射部位15s左右，再以同样的方法注射第二只后足。
3.2.5 注射完成，轻柔的将动物放回笼内。
3.3 SC免疫流程。
3.3.1 佩戴防护镜，防止液体键入眼睛。
3.3.2 保定人员固定住动物颈部，轻轻将其按住，露出动物背部和臀部。
3.3.3 若有必要，剃去注射部位毛发，并予以标记。
3.3.4 选择一侧给药点，用75%酒精对注射部位进行消毒。
3.3.5 轻轻捏住注射部位皮肤并提起。
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