PCR产物的克隆
PCR 产物克隆大致分为两类，即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的 PCR 产物直接进行连接。载体可用 EcoR V 或 Sma I 切成平头； PCR 产物纯化后，可以在
蛋白质表达常见问题分析
影响蛋白表达有许多因素，如目的蛋白自身的特点，表达载体、表达菌株的组合，诱导表达的条件，培养基的选择 等，都有可能对蛋白的表达产生影响。
荧光素酶及其报告基因的应用和检测6
二 荧光素酶 荧光素酶（ Luciferase ）是生物体内催化荧光素 (luciferin) 或脂肪醛 (firefly aldehyde) 氧化发光的一类酶的总称 , 来自于自然界能够发光的生物。 自然界存在的荧光素酶来自萤火
移植排斥反应2
一、排斥反应的机制 移植排斥反应过程很复杂，既有细胞介导的又有的抗体介导的免疫反应参与作用。 1．T细胞介导的排斥反应在人体和实验性组织、器官移植中证实，T细胞介导的迟
质粒的制备、提取
背景（2）： 克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制，清楚了解其利用价值和途径。质粒包括 多种类型 例如 基因过表达质粒、干扰质粒和启动子
氨基酸的分类
极性不解离R基氨基酸 有七种，即含羟基氨基酸三种（丝、苏和酪，这三种源于羟基），酰胺类氨基酸两种（天冬酰胺和谷氨酰胺，这两种源于氨基）。含巯基的半胱氨酸和甘氨酸。
PCR产物的平末端克隆
靶基因经PCR扩增，样品进行必要的纯化回收后，接下来用平末端进行连接克隆也是分子生物学实验中常规采用的技术路线，实验一般利用噬菌体T4DNA聚合酶等补平扩增DNA片段的末端（W
操作篇：western blot 之发光鉴定
一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。
免疫组化Elivison二步法
1、石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。 2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组
单细胞电泳技术(一)
单细胞电泳技术，
