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MTT 的操作方法(一)

检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪

miRNA实时荧光定量PCR检测试剂

miRNA参与许多生物学活动,其异常表达与不可治愈的疾病有关,是一类很有前途的标志物。有许多PCR方法分析miRNA的表达水平。基于自有专利技术,美国Signosis公司开发了一种高灵敏、高miRNA参与

miRNA的功能分析策略

在发育或分化的不同阶段以及疾病模型中,利用miRNA特异的芯片能绘制出细胞和组织的miRNA表达谱,这能够揭示出参与了这些进程的特定miRNA。miRNA的过表达和沉默,则是一种有力的方法来研究

miRNA检测

3. RT-PCR也被用来检测miRNA前体的表达水平, 其他基于PCR技术检测miRNA的方法有 引物延伸法,就是在引物的5 末端加一个特异标记,可以定量测定低丰度的RNA含量; 原位杂交技术(

核酸的抽提---mRNA的分离步骤

与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA 中分离mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。

质粒转染细胞株基因检测 (miRNA靶基因验证)

实验共分以下3个主要步骤: 1. 质粒转染细胞;2.双报告基因检测;3. 统计学分析。

细胞中mRNA原位杂交技术

原位杂交组化( ISHH )属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交

双萤光素酶报告基因检测 (miRNA靶基因验证)实验

萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双报告基因则

植物组织mRNA提取

mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA 3‘末端含有Poly(A+)的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下

miRNA Northern Blot实验技术应用

miRNA Northern Blot实验技术应用 MicroRNA(miRNA)是真核生物中一类长度约为20-25nt(核苷酸)的非编码单链RNA分子,在生物进化过程中高度保守,约占整个基因组基因总数2%。大量研究表明,

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