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RNA酶活性的控制

为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入

RNA操作中的一般要求

在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存

RNA酶保护试验(RPA)

一、RNA酶保护试验(RPA) RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)即糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。本文主要介绍

S1核酸酶保护实验

一、材料准备 4μL5X T4激酶缓冲液 5 μl [γ-32P] ATP(7000次/毫摩尔) 10 μl 水+寡核苷酸(200毫微克) 1μlT4激酶 1. 37摄氏度1小时 2. 热失活,在75℃下10分钟。 3. 加入1μl糖原(20毫克/毫升),

核糖核酸酶保护测定(二)

1. 加入适当体积的RNA(12 μl)+探头(3 μl)。 尝试5和10μg 的RNA加600或800页高辛标记的探针。 2. 包括2-3的酵母RNA样品/探针使用。 3. 加入20 μl SOLN。 A到所有涡管(FV =30 μl)和自旋向下。

如何改善RNA提取质量

1. 在收获组织及细胞死亡之后,应立即灭活内源的 RNA 酶,以防止 RNA 降解。 以下 3 个方法均可有效使内源 RNA 酶失活: ( 1 )用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆

动物总RNA的提取与电泳

I. 实验目的与要求 A. 理解和掌握提取和纯化动物总 RNA 的技术原理和操作方法。 B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总 RNA 的技术原理和操作方法。 II. 实验原理和背景知识

RNA标记

RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景

TRIzol RNA提取方法

(一)试剂准备 1.TRIzol试剂。 2.氯仿 3.异丙醇 4.75%乙醇(DEPC H2O配制) 5.DEPC H2O (二)操作步骤 1. 样品处理: (1)培养细胞:收获细胞1-5×107,移入1.5ml离心管中,加入1ml Tr

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

一、实验目的 学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。 二、实验原理 RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定

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