体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-11-16
实验方法原理
抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性，最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。
实验材料 小鼠试剂、试剂盒 小牛血清DMEMDOX
仪器、耗材 CO2培养箱无菌钢圈
实验步骤
一、培养条件
用含10%小牛血清的DMEM培养液，5%CO2，37℃培养。
二、实验步骤
1. 将CHO细胞培养在含10%血清的DMEM培养液中，先用DOX（阿霉素）0.01 ug/ml 诱导培养CHO细胞3个月。
2. 然后在3个月内逐步增倍DOX的浓度达0.1 ul/ml，接着进行DOX低浓度的筛选。
3. 随后用无菌钢圈套取抗性倍数较高的克隆RC1作CHO和RC1对DOX的剂量-反应曲线，求CHO和RC1的IC50值。
4. 抗性倍数即为RC1的IC50与CHO的IC50。
注意事项
1. 要具备培养细胞的实验室条件，谨防污染。
2. 通过实验计算出敏感细胞对该药物的IC50值，以确定其实诱导浓度。
3. 采用长期增量的培养法可产生稳定的抗药性细胞株，对阿霉素等产生抗性的细胞株，往往对其他天然来源的抗肿瘤药亦可产生抗药性。（转帖）
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