分子提取方法四

RNA提取前须知

1、操作中戴口罩和手套

2、清洁无尘环境中操作,试验台、移液器要用75%乙醇擦拭消毒,也可使用RNase抑制剂,操作时避免大声喧哗和频繁走动。

3、玻璃器皿常规洗涤后,应用0.1%焦磷酸二乙酯(DEPC)浸泡处理,然后再用灭菌双蒸水漂洗几次,高压灭菌去除DEPC160℃烘烤4h

4、移液器枪头和离心管要经DEPC处理水处理、高压灭菌后使用。

5、提取后的总RNA定量后部分用于反转录,剩余RNA样品标记并用封口膜封口后-80℃可保存数月。

6、配置0.1%DEPC处理水 DEPC是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,常用浓度为0.1%1L配方:DEPC 1ml,蒸馏水 1L,摇床过夜,高压灭菌30min

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