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细胞凋亡三

细胞凋亡的检测方法主要包括以下几种:细胞径HE、吖啶橙(AO)、Hoechst33342、Hoechst33258染色,利用光境或荧光显微镜对细胞形态学特征进行观测。其中Hoechst33342/PI双标记法是检测细胞凋亡的常规方法。PI是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,由于坏死细胞的膜透性发生改变,则能被PI染色。Hoechst33342是能能够与DNA特异结合的具有良好膜通透性的荧光染料,正常细胞、坏死细胞及凋亡细胞的DNA均可被Hoechst33342染色,当细胞经Hoechst33342/PI双染色后,坏死细胞呈PI强阳性染色(红色),而凋亡细胞或正常细胞呈PI低染,利用荧光显微镜技术结合凋亡细胞核形态的变化就可以将坏死细胞、凋亡细胞和正常细胞区分开来。‚利用DNA凝胶电泳及DNA片段原位标记法(TURNEL assay)检测凋亡细胞DNA的断裂。ƒ利用流式细胞仪检测亚G1期细胞的比例或利用Annexin V、PI联合标记法检测细胞膜磷脂酰丝氨酸翻转,正常活细胞Annexin V、PI均低染;凋亡细胞Annexin V高染、PI低染;坏死细胞PI高染。


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