蛋白印迹法

三 电泳

*考马斯亮蓝法：用40%双蒸水/10%醋酸/50%甲醇的溶液固定胶中蛋白    考马斯亮蓝R-250染色室温染色4h过夜，保持摇匀     转入67.5%双蒸水/7.5%醋酸/25%甲醇摇匀脱色   蛋白被染成深蓝色。

 四 转膜

转膜方式有半干式和湿转两种。半干式转膜速度快，但高分子量蛋白转膜效果较差。高分子量蛋白质与胶相互作用较强，从胶中移出较难。因此，一般大于120-150kDa的蛋白用半干式转膜时，可选用碱性电转缓冲液，也可在电转缓冲液中加SDS。但SDS妨碍蛋白与膜的结合，尤其对小分子蛋白。湿转成功率高，特别适用于大分子量（大于100kDa）的蛋白。

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