免疫电泳实验
免疫电泳是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来，用于分析抗原组成的一种定性方法。先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳，然后在琼脂板中央挖一横槽，加入已知相应的免疫血清，两者经一
白细胞介素8（IL- 8）检测实验
实验方法原理 采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体，其中一株（4D7）作为包被抗体，以识别和结合待检标本中的IL-8，另一株作为酶标抗体，与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合
ChIP染色质免疫沉淀技术
染色质免疫沉淀技术还可用于分析两种蛋白共同结合的DNA序列，即ChIP reChIP方法。ChIP reChIP是在第一次ChIP的基础上不解交联，而继续进行另一个目的蛋白的免疫沉淀，从而得到与两种目的蛋白都
ChIP染色质免疫沉淀技术
交联反应的逆转和DNA的纯化： 用不含DNase的RNase和Proteinase K，65oC保温6小时逆转交联，经DNA纯化柱回收DNA或用酚氯仿抽提、乙醇沉淀纯化DNA。DNA纯化柱纯化DNA的质量高，有利于下一步PCR等方法
ChIP染色质免疫沉淀技
背景： 染色质免疫沉淀技术 (Chromatin Immunoprecipitation ，简称 ChIP) 是研究体内蛋白质与 DNA 相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组
ChIP染色质免疫沉淀技术
染色质免疫沉淀中的对照与抗体选择 抗体选择： 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。因为在蛋白质与染色质交联结合时，抗体的抗原表位可能因为与结合
蛋白质检测（五）
蛋白印迹法 四转膜 操作步骤： 1 准备：切好的 PVDF 膜和滤纸置于甲醇 5min ， PVDF 膜置于电转缓冲液浸泡 10min 以上。 * 转一张膜需 6 张 6cm ×9cm 滤纸和 1 张 6cm×9cmPVDF 膜，滤纸和膜的尺寸
蛋白质检测一
蛋白印迹法 蛋白印迹（ Western blot, WB ）是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种试验方法，是将蛋白质通过 SDS-PAGE 电泳后，再转移到杂交膜上，然后通过抗原抗体复合物对
蛋白质检测（七）
蛋白印迹法 五 抗原 - 抗体反应 4 二抗的处理 （1） 常用二抗： HRP 偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗，但不够灵敏。 （2） 二抗稀释液： PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封闭液等
蛋白质检测（十六）
凝胶迁移或电泳迁移率实验 实验步骤： 5.洗膜 （9） 加入 6mlLuminol/Enhancer Solution 和 6ml Stable Peroxide Solution, 避光置于锡箔纸包好的烧杯中，摇匀，作为 Substrate Working Solution 。 （10） 将膜
