对手术室切除的全部或部分器官或大块组织切除标本;各种纤维内窥镜取材的小块组织标本:各种穿刺取材的穿刺小标本,各种细胞学标本,一些特殊检查的体液或血液标本,在取材时要做到准确、迅速、完整和具有代表性,从而保证组织病理的制片质量。病理科选材制片时根据不同组织用不同固定、脱水时间,不同的制片染色方法,例如:各种穿刺取材的小标本固定、脱水时间应缩短,脂肪组织固定脱水时间应延长。硬组织用新切片刀制片。软、破碎组织和活检组织已使用过旧切片刀制片。

      HE染色时根据不同组织选不同染色、脱水、脱腊时间。HE染色操作程序如下:1)二甲苯去蜡(经2次)5～ 10 min。2)无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇各1～ 2 min,然后蒸馏水洗3 min(换数次)。3)苏木紫液染色约3～ 5 min(视染液种类和着色情况增减)。4)水洗;1%酸性乙醇(盐酸1 mI,70%乙醇99 ml),或1%盐酸分化。显微镜下控制。5)流水浸洗至少15 min,至细胞核呈蓝色。也可短时水洗后,浸于40℃温水使核变蓝。显微镜观察,若核染色过深或不足,应再分化或重染。6)伊红液染0.5～ 1 min后,95%乙醇2次,无水乙醇2次,每次约1～ 2 min。7)苯酚二甲苯(1∶ 3)5 min。8)二甲苯2次,每次3～ 5 min。9)用中性树胶或DPX以盖片封片,贴标签。

染色各步骤所需的时间,常受温度、切片厚度等影响,可根据镜下观察所见酌情予以调整。各种染料试剂一般选用化学纯。各种染料着色效果常因生产厂和批号不同而异,启用任何新品,均应先试染。配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内,瓶签应写明名称、含量、配制年月日,顺序保存于避光橱中,必要者放冰箱内。凡须临用时配制者,配量应适当。但对组织化学反应(尤其是酶),其时间、温度等因素务必恒定,且应做对照片。染液着色力显著减退时应更新,染色反应不正常,应检查染液及试剂是否失效或误用。染色过程中,勿使切片干燥,以免影响细胞形态。染色完毕后用显微镜检查染色结果,是否符合要求,并核对标本种类、号码、数量是否无误,以保证制片的质量,为临床病理诊断垫定坚实基础。

     组织细胞取材、固定、脱水、切片的质量对HE染色影响很大,组织染色的质量直接影响到临床诊断,同时也影响临床治疗。所以对各种不同的标本取材要求不一样,包括取材的范围、取材方法,取材用的工具或者同样的工具要求采用不同的使用方法来切取标本。以防挤压组织,引起组织结构的变形。钳取困难时可采取针吸,实质性脏器肿物直径大于2 cm者均可针吸。例如,肺癌表面常覆盖有一层较厚的凝固性坏死或脂性分泌物,为提高标本的阳性率,可采用针吸方法,深部取样,体液量多要取其离心后的沉渣。骨组织要进行脱钙,否则造成制片困难,破坏细胞结构,HE染色得不到良好的效果,影响临床病理诊断。