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HE染色技术几种常见的染色问题

伊红着色方面:

 

       A.切片中央区域伊红染色不均匀, 可能为弱碱性溶液残留导致伊红拒染所致。

 

原因:伊红染液的pH 值可能大于5 ;也可能是蓝化液残留过多;切片太薄;或切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。

 

对策:检查伊红染液的pH值,用乙酸将其调节在4.6-5.0 之间,使伊红染色色彩艳丽;

         确保每次蓝化后,用自来水冲洗干净;

         检查切片的厚度;

         脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长, 因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。

      B.伊红深染导致细胞核与细胞质没有层次,缺乏对比度。

 

 

 

原因:伊红染色液浓度太高;

         切片在伊红染色时间过长;

         切片在伊红染色后经乙醇脱水步骤时过快,

         而使乙醇分化伊红的作用不能产生。

 

 

 

对策:适当稀释伊红染色液,减少伊红染色时间;

         或者使切片在乙醇脱水等步骤时,停留时间相对均匀;

         检查切片的厚度是否合适。

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