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切片预处理

1.二甲苯中37℃脱蜡2次,15min/次。

2.无水乙醇浸泡2次,每次3min

3.95%乙醇浸泡2次,每次3min

4.PBS浸泡一次,3min

5.2%DEPC水室温下浸泡10min

6.PBS浸泡10min

7.0.2mol/L HCl浸泡30min

8.PBS浸泡2次,每次3min

9.滴加蛋白酶K15ug/ml),37℃孵育15min

10.0.1%甘氨酸处理5min

11.4%多聚甲醛再次固定10min

12.PBS清洗2次,每次5min

13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min

14.SSC清洗2次,每次5min

15.滴加预杂交液,上面盖封口膜,使预杂交液不会干掉,随后放入湿盒,40℃孵育1-2h

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