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细胞中酸性磷酸酶的定位

实验方法与步骤:

1 20g左右小白鼠一只,每日向其腹腔注射6%淀粉肉汤1ml,连续3d

2 在第三次注射后4和,向腹腔注射生理盐水1ml

3 颈椎脱臼法处死小鼠后,打开腹腔,用注射器(不装针头)直接吸取腹腔液。

4 向预冷的盖玻片上滴一滴腹腔液,立即用牙签图后放入小培养皿4℃冰箱中30min,使细胞自行铺展开。

5 冷风吹干玻片。

6 多聚甲醛固定30min

7 PBS冲洗。

8 向盖玻片上滴加酸性磷酸酶工作液,37℃,30min

9 蒸馏水洗净,吸去多余水分。

10 放入2%硫化铵溶液中处理5min,蒸馏水洗净。

11 封片

12 镜检。

13 对照实验:将腹腔涂片置50℃温育30min使酶灭活,再进行6-12步同样的实验。

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