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启动子质粒

一、操作前准备 1. 仪器设备 PCR仪、37℃恒温培养箱、37℃恒温摇床、水浴锅、超净工作台、高速离心机等等。 2. 试剂 过表达载体质粒(pGL3-Basic等)、限制性内切酶、胶回收试剂盒

杂交和显色

1、将加入探针的杂交液先于50℃预热,均匀涂于切片表面,加上硅化盖玻片,放于湿盒中,50℃孵育12-16h。 2、1×SSC(含50%甲酰胺),50℃洗涤2次,每次10min。 3、2×SSC(含50%甲酰胺),

PH探针染色这4点要注意!

BCECF AM是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF AM即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein,acetoxymethyl ester,本BCECF AM (pH荧光探针)是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。 BCE

代谢组学∣如何得到真正的高质量数据?

代谢组学研究中,高通量数据批次内和批次间存在的非生物误差对分析结果有不可忽视的影响。那么如何得到真正的高质量代谢组学数据? 首先,样品的检测要持续很长时间,尤其是当样本

细胞中mRNA原位杂交技术

原位杂交组化(ISHH)属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。

文献精选丨【IF9.1】ACVR2能够诱导TGF作用通路上的基因

ACVR2基因编码激活受体复合体的2型亚单位。2型亚单位与激活子信号密切相关;细胞外结合域与激活素结合,而细胞内激酶域激活激活SMAD的i型亚单位。我们以前的研究在胃肠道肿瘤中发

质粒的制备、提取(一)

背景(1): 质粒是一种双链共价闭合的环状DNA,是染色体以外的稳定遗传因子。已经在细菌、真菌以及部分动植物细胞中发现质粒,以细菌中存在质粒最为普遍。质粒的制备与提取是

DNA定量测定-Feulgen反应

实验背景与原理: DNA是主要的遗传物质,集中于染色体上。在真核细胞中DNA主要存在于细胞核中,在线粒体和叶绿体中也有少量分布。DNA的基本组成单位是脱氧核糖核酸,它由脱氧核糖

质粒的制备、提取

克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制,明了其利用价值和途径。质粒包括基因过表达质粒、干扰质粒和启动子质粒等等多种类型,主要的差别

启动子质粒(十三)

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 附录: 1 OD260 和 OD280 的比值表示质粒的纯度。比值大于 1.8 ,说明纯化产物的纯度达到了 90% 。纯化好的质粒可用于转染实验,一般纯化步骤在细胞间