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启动子质粒(十二)

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 1. 将之前提取好的质粒放入 1.5ml 离心管中,加入 1/10 体积的 3mol/L 无菌乙酸钠溶液。 2. 加入 2 倍体积的无水乙醇,放置于 -20 ℃沉淀 4-6h 或过夜。 3

启动子质粒(十)

(二) 收获细菌并裂解 1. 离心扩增好的菌液,按说明书将菌液重悬,转入 1.5ml 离心管中。 2. 用质粒小量抽提试剂盒,按说明书要求提取质粒。 3. 细菌高速离心 1min, 彻底去除上清。

启动子质粒(十一)

三、 质粒提取 8、 将吸附柱放入收集管内,离心得到的上清转移至吸附柱,室温, 15000rpm ,高速离心 30s 。 9、 弃废液,将吸附柱放入收集管,加入 700ul WB 溶液到吸附柱中, 15000rpm ,

启动子质粒(九)

三、 质粒提取 (一) 摇菌培养 1. 将鉴定测序正确的克隆菌液涂在 LB 固体平板。 2. 置于 37 ℃恒温培养箱,培养 12-17h ,待长出菌落。 3. 灭菌 15ml 离心管内加入 5ml 含抗生素的 LB 液体培

启动子质粒(八)

二、 菌落制备主要环节 (三) 连接 将回收的 PCR 产物连接入 pGL3-Basic 载体中,反应体系如下: T4 连接酶 1uL 5×buffer 1uL 酶切质粒( 50ng ) _ul 酶切 DNA 片段( 100ng ) _uL DDW 20uL * 16℃连接

基因芯片技术(八)

七 结果的分析 样品在被测定前,首先要经过消化,使待测组织细胞中的 DNA 或 RNA 释放出来,在经过适当的扩增后,以荧光标记物标记,放入基因芯片自动孵育装置( Fluidics Station )中

基因芯片技术(七)

2. . 生物素标记方法中的杂交信号探测 以生物素( biotin )标记样品的方法由来已久,通常都要联合使用其它大分子与抗生物素的结合物(如结合化学发光底物酶、荧光素等),再利用

基因芯片技术(六)

(4) 光纤传感器 有的研究者将 DNA 芯片直接做在光纤维束的切面上(远端),光纤维束的另一端(近端)经特制的耦合装置耦合到荧光显微镜中。光纤维束由 7 根单模光纤组成。每根

基因芯片技术(四)

(2) 激光扫描共焦显微镜 激光扫描共焦显微镜与激光扫描荧光显微镜结构非常相似,但是由于采用了共焦技术因而更具优越性。这种方法可以在荧光标记分子与 DNA 芯片杂交的同时进行杂

基因芯片技术(三)

(1) 激光扫描荧光显微镜 探测装置比较典型。方法是将杂交后的芯片经处理后固定在计算机控制的二维传动平台上,并将一物镜置于其上方,由氩离子激光器产生激发光经滤波后通过