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启动子质粒(二)


二、菌落制备主要环节

(二)双酶切
将PCR回收产物和pGL3-Basic空载体同时进行双酶切。
1.双酶切体系
(1)DNA回收片段酶切的试剂和剂量如下:
     Xho Ⅰ                          1ul
     Hind Ⅲ                         1uL
     DNA片段(300ng)               _uL
     DDW                            20uL
(2)pGL3-Basic空载体酶切的试剂和剂量如下:
     Xho Ⅰ                          1ul
     Hind Ⅲ                         1uL
     质粒(500ng)                   _uL
     DDW                            20uL
2.双酶切产物回收

    依据琼脂糖凝胶回收试剂盒操作进行。

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