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启动子质粒(五)

三、质粒提取

(二)收获细菌并裂解

  1.离心扩增好的菌液,按说明书将菌液重悬,转入1.5ml离心管中。

  2.用质粒小量抽提试剂盒,按说明书要求提取质粒。

  3.细菌高速离心1min,彻底去除上清。

  4.加入250ulRB溶液,振荡器充分悬浮细菌。

  5.加入250ulLB溶液。立即上下颠倒10次,使细菌裂解,室温,放置2min

  6.加入250ulNB溶液。立即上下颠倒10次,使之充分中和,室温,放置2min

  7.室温,1500rpm,高速离心15min

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