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启动子质粒(十二)

三、质粒提取

(三)质粒的纯化

1. 将之前提取好的质粒放入1.5ml离心管中,加入1/10体积的3mol/L 无菌乙酸钠溶液。

2. 加入2倍体积的无水乙醇,放置于-20℃沉淀4-6h或过夜。

3. 4℃,高速离心机14000rpm,离心20min.

4. 弃去上清,70%乙醇洗2次。

5. 空气干燥,可置超净工作台干燥。

6. 200ul无菌水溶液干燥后所得沉淀,即为质粒溶液。

7. 紫外分光光度计测量质粒浓度和产量。

测量OD260OD280的值:质粒DNA浓度=OD260×50×稀释倍数(μg/mL)。

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