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免疫电泳实验步骤


  免疫电泳是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳,然后在琼脂板中央挖一横槽,加入已知相应的免疫血清,两者经一定时间相互扩散后,就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。

实验材料: 待检抗原 

试剂、试剂盒: 抗体、琼脂、巴比妥缓冲液

仪器、耗材: 电泳仪、载物玻片、打孔器、玻璃铸型、微量进样器

实验步骤

  1.取载物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶,制成2毫米厚的琼脂板。
 
  2.按图位置,在琼脂板未凝固时,放入抗血清槽铸型,注意勿使铸型全部浸入琼脂中,待凝固时再打孔。
 
  3.加待检标本:用微量进样器往孔中加1~5微升。
 
  4.电泳:电压9~7伏/厘米,泳动15~20小时。
 
  5.电泳后取出抗血清槽铸型,加入抗血清,进行双扩散,一般在24小时内沉淀弧出全。
 

  6.观察结果:或描绘、拍照或进行染色,染色后的标本便于结果分析及保存。


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