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不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究-【动物实验】

目的:提供直接的定量数据,用于以后优化NSC的分离和培养,并详细了解和比较不同胎龄小鼠的整个大脑和大脑皮层中神经干细胞(NSC)的比例。

方法:将不同胎龄小鼠的全脑(胎龄分别为12.5、14、16和18天)和大脑皮质(胎龄14、16和18天)的组织分离并消化,消化成单个细胞悬浮并孵化3个? 4小时,细胞介导的免疫荧光标记了NSC的特异性标记物Nestin,并统计分析了每组中NSC的比例。此外,实时荧光定量PCR技术用于检测不同胎龄(12.5、14、16和18天)的小鼠大脑皮质中Nestin mRNA表达水平。

结果:细胞介导的免疫荧光结果表明,分离和培养的不同胎龄小鼠的整个大脑和大脑皮层组织中都存在巢蛋白阳性细胞。在分离和培养的小鼠全脑组织中,在12.5天胎龄组中,NSC的比例最高,为53.42%±1.57%。 18天胎龄组中NSC的百分比最低,为25.96%±。 1.31%,胎龄为14天。第16组位于两者之间。在分离和培养的不同胎龄小鼠的大脑皮质组织中,以14天胎龄组的NSC比例最高,为33.65%±0.29%;以14天胎龄组的比例最低,为25.29%。这是±0.28%,并且16天胎龄介于两者之间(26.82%±0.30%)。实时荧光定量PCR的结果显示,当受孕周组的小鼠大脑皮质中巢蛋白mRNA的表达水平设为1时,小鼠大脑皮质中巢蛋白mRNA的相对表达。胎龄为0.83±0.04、 16天胎龄为0.77±0.05、而18天胎龄为0.44±0.05、因此,随着小鼠胎龄的增加,小鼠大脑皮层Nestin mRNA的表达水平逐渐降低。

结论:在小鼠大脑发育过程中,分离和培养的小鼠的全脑和大脑皮层组织中神经干细胞的比例随着胎龄的增加而逐渐降低。

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