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单细胞电泳技术(二)

5 制片:在载玻片两端用搭桥法放置盖片,两搭桥盖片间宽度为1cm,将细胞悬液与配置好的1%的低熔点琼脂糖(LMP)以1:1的比例在小离心管内混匀;在桥面盖片和载玻片间灌入约100ul细胞与胶的混合液,置于4℃。

6 胶凝固20min后,小心从载玻片一侧抽取下各张搭桥盖片,抽取过程中注意保持胶面平整。

7 裂解:将载玻片移入裂解槽,注入裂解液,浸没玻片,4℃避光裂解1.5-2h

8 水洗:将载玻片移入新的裂解槽,注入三蒸水浸没玻片,4摄氏度水洗3次,每次5min

9 解旋:将载玻片移入新的裂解槽,注入电泳缓冲液,浸没玻片,4摄氏度解旋20min

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