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细胞划痕(迁移)实验


1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约 每隔1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  

2、在空中加入约5×105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。

3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。

4、用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。  

5、放入375% CO2培养箱中培养。按061224小时取出,拍照 (具体时间依实验需要而定)

6、统计方法:使用Image J软件打开图片后,随机划取68条水平线,计算细胞间距离的均值。

7、数据处理:每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离,求出均数和标准差,时间为横轴,迁移距离为纵轴(mm)作图,并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。

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