习惯上，蛋白质的浓度通常是按 Lowry 及其合作者（Lowry 等，1951) 的方法用 Folin-Ciocalteau 试剂进行测定的。但样品中的盐或去垢剂等对这种方法有干扰。Peterson(1977) 介绍了一种改进方法，可部分地解决这些问题

试剂、试剂盒         

试剂 A 试剂 B牛血清白蛋白脱氧胆酸钠 三氯乙酸钠

实验步骤     

材料

牛血清白蛋白（BSA)

脱氧胆酸钠（0.15%)

三氯乙酸钠（TCA;72%)

试剂

试剂 A

试剂 B

(配方，见“试剂的配制” pp.234~240)

操作程序

1) 用蒸馏水配制 lmg/mlBSA 溶液，分装，冻存于-20°C 备用。

2) 作标准曲线，于 1.5-ml 微量离心管中配制下列混合物：

3) 用蒸馏水稀释膜蛋白样品（1:10)，分別取 5-ul、10-ul、20-ul 等分试样供测定。对于已溶的膜蛋白或 WGA 柱层析组分，不必稀释，取 10ul 即可。另取 10ul 缓冲液于空白对照管，用以测定缓冲液组分的吸收值。

注：如无干扰物质、其含量可忽略或经适当控制，则第 4~8 步可省略。在这样的情况下,用蒸馏水将每个样品稀释至 0.4 ml。

4) 用蒸馏水稀释膜蛋白样品至 1 ml。

5) 每管加 0.1 ml 0.15% 脱氧胆酸钠。混合，室溫放置 10 min。

6) 每管加 0.1 ml 72%TCA。混合，室温下微型离心机离心 15 min。

7) 弃上清。可有效地用吸管吸出。

8) 每管加 0.4 ml 蒸馏水。

9) 每管加 0.4 ml 试剂 A，震荡混匀，室温放置 10 min。

10) 每管加 0.2 ml 试剂 B, 立即混合。室温孵育 30 min。

11)750nm 下读吸光度。

注：在 2 h 之内读吸光度，除非各样品组中都包含有标准蛋白样品。室温下每小时腿色为 1%~2%, 将 8~10 步的体积缩小 10 倍，增加其灵敏度，此法可容易地转为微量测定。除作标准曲线时，蛋白用量减为 0.1~10ug 外，1~7 步均与常量测定同。

12) 以标准样品管中的蛋白量对 750nm 吸光度作图，绘出标准曲线。

13) 根据各被测样品在 750nm 处的吸光度，从标准曲线査出该样品的蛋白含量。

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