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PCR产物的克隆

PCR 产物克隆大致分为两类,即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的 PCR 产物直接进行连接。载体可用 EcoR V 或 Sma I 切成平头; PCR 产物纯化后,可以在

PCR产物的平末端克隆

靶基因经PCR扩增,样品进行必要的纯化回收后,接下来用平末端进行连接克隆也是分子生物学实验中常规采用的技术路线,实验一般利用噬菌体T4DNA聚合酶等补平扩增DNA片段的末端(W

实时荧光定量PCRrealtime PCR

实时荧光定量PCRrealtime PCR

逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板

聚合酶链式反应(PCR)2

实验材料模板DNA 试剂、试剂盒dNTPTaq DNA聚合酶蒸馏水PCR缓冲液引物氯化镁 仪器、耗材PCR仪移液枪PCR板薄壁管离心管离心管盒 实验步骤 一、标准的PCR反应体系 10×扩增缓冲液 10 ul 4种dN

PCR-SSCP 技术实验

聚合酶链式反应-单链构象多态(Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism,PCR-SSCP)技术是在PCR技术基础上发展起来的,它是一种简单、快速、经济的用来显示在PCR反应产物中单碱基突

聚合酶链式反应(PCR)

PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万

使用 Trizol 纯化 RNA 实验

RNA 分离的酚基试剂的生产以 Chomczynski 方案为基础。这些方案在从富含 RNA 酶的组织如胰腺中获取 RNA 时最有用。这里介绍的是随 Invitrogen 的 Trizol 试剂出售的方案的摘要,经 Invitrogen 允许做了修

AFLP-PCR实验

一、原理 AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行

从石蜡包埋固定的组织中制备 RNA 实验

该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。

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