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单克隆实验技巧

当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力,各种理化因素可能导致细

植物组织蛋白质提取方法

1、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。

凝胶迁移或电泳迁移率实验

探针为含有与蛋白特异性结合的中心盒,大约20bp。

蛋白激酶你知道多少?

蛋白磷酸化是多种信号转导途径中的重要环节,细胞内大部分重要的生命过程都涉及蛋白磷酸化。蛋白激酶很多,根据其底物蛋白被磷酸化的氨基酸残基种类,可将它们分为 5 类,其中丝氨酸

分子提取方法

蛋白提取 组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织) 1、颈椎脱臼处死小鼠,75%乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。 2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。 3、称取0.6g左右肝组织,在平皿中剪碎组织

蛋白印迹法

样品处理及上样 1、取15-20ug蛋白,加2倍SDS上样缓冲液7ul,DDW定容至总体积14ul。 * 上样总体积一般少于15ul,加样孔的最大限度可加20ul样品。 2、95℃孵育5min,使蛋白变性。

抗原-抗体反应

二抗的处理 (1)常用二抗:HRP偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗,但不够灵敏。 (2)二抗稀释液:PBS/PBS-T液、TBS/TBS-T液、一般的封闭液等。 (3)二抗稀释倍数:根据二抗说明书

显色

酶和底物反应显色是蛋白印迹法的最后一步,一般常用酶有HRP和AP,根据成像底物可分为显色底物和发光底物。发光底物可选用HRP标记二抗,显色底物可选用HRP标记二抗或AP标记二抗。显色分为

制备抗肽抗体实验

制备抗肽抗体实验 先将10mgBSA溶于0.5ml0.1mol/lpH6.8的磷酸钠缓冲液当中,放在一个2ml的玻璃试管中,加50μlMBS/DMF溶液,并在室温下温和搅拌30min的时间。加样到PD-10柱子上,上柱前用10ml的0.1mo

蛋白提取

组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织) 1、颈椎脱臼处死小鼠,75%乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。 2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。 3、称取0.6g左右肝组织,在平皿中剪碎组织,并转

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