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ChIP染色质免疫沉淀技术(四)

抗体选择: 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是ChIP实验成功的关键。因为在蛋白质与染色质交联结合时,抗体的抗原表位可能因为与结合位点的距离太近,不能被抗体识别,所以不能

制备抗肽抗体实验

先将10mgBSA溶于0.5ml0.1mol/lpH6.8的磷酸钠缓冲液当中,放在一个2ml的玻璃试管中,加50μlMBS/DMF溶液,并在室温下温和搅拌30min的时间。加样到PD-10柱子上,上柱前用10ml的0.1mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液预

ChIP染色质免疫沉淀技术

染色质免疫沉淀技术还可用于分析两种蛋白共同结合的DNA序列,即ChIP reChIP方法。ChIP reChIP是在第一次ChIP的基础上不解交联,而继续进行另一个目的蛋白的免疫沉淀,从而得到与两种目的蛋白都

蛋白质检测

蛋白印迹(Western blot, WB)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种试验方法,是将蛋白质通过SDS-PAGE电泳后,再转移到杂交膜上,然后通过抗原抗体复合物对特定蛋白质进行特异性检

单克隆实验技巧

当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力,各种理化因素可能导致细

植物组织蛋白质提取方法

1、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。

凝胶迁移或电泳迁移率实验

探针为含有与蛋白特异性结合的中心盒,大约20bp。

蛋白激酶你知道多少?

蛋白磷酸化是多种信号转导途径中的重要环节,细胞内大部分重要的生命过程都涉及蛋白磷酸化。蛋白激酶很多,根据其底物蛋白被磷酸化的氨基酸残基种类,可将它们分为 5 类,其中丝氨酸

分子提取方法

蛋白提取 组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织) 1、颈椎脱臼处死小鼠,75%乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。 2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。 3、称取0.6g左右肝组织,在平皿中剪碎组织

蛋白印迹法

样品处理及上样 1、取15-20ug蛋白,加2倍SDS上样缓冲液7ul,DDW定容至总体积14ul。 * 上样总体积一般少于15ul,加样孔的最大限度可加20ul样品。 2、95℃孵育5min,使蛋白变性。

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