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免疫共沉淀1

免疫共沉淀 RIPA Buffer 配置 1. 基础成分 (1) Tris-HCl (防止蛋白变性的缓冲液成分) (2) NaCl (防止非特异性蛋白聚集的盐分) (3) NP-40 (用 H2O 配置成 10% 储存液。 NP-40 为非离子去

蛋白印迹法

电泳条件:电压 200V ,电流 8mA ,染料进入分离胶时电流增加到 16mA ,时间一般 2-3 小时。 * 溴酚蓝刚跑出胶即可终止电泳进行转膜,也可以根据时间经验停止电泳。 * 电泳后检测蛋白是

膜蛋白脂蛋白体

体外小麦胚系统+ 脂质体技术 亚诺法体外蛋白质表达系统以小麦胚真核翻译机制为基础开发而成。小麦胚将所有翻译所需的成分存储于干燥浓缩的状态,在胚芽开始成长时即进行蛋白质

GST融合蛋白纯化方法

1 目的片段接入pGEX载体; 2 涂板,挑单克隆,摇菌至OD600≈1.0,加入IPTG(终浓度1 mM)诱导6-8 h; 3 收菌,每升菌液约以50 mL PBS重悬,加入1%Triton X-100(v/v),1%β-巯基乙醇(v/v),P

蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法

蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以: (1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质; (2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况; (3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质

蛋白质分离纯化的新技术及技术要点

浅述蛋白质分离纯化的新技术 摘 要: 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的

没有人能随随便便 WB 成功,WB问题整理来了

做了很久的 WB(western blot),走了很多弯路,其实发现 WB 想要做好并不难,总结了 WB 实验中可能会遇到的问题,分析了可能的原因及对应的解决方案,希望能成为你实验成功的基石。

提高蛋白质的稳定性方法

葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变,以脯氨酸(Pro138)替代Gly

蛋白样品制备中各类杂质和杂蛋白的去除

蛋白样品制备中,在细胞破碎之后,既可以利用特定蛋白质的特性来分离某一类蛋白质,比如亲和纯化,比如前面介绍的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一个考虑方向是去除杂

蛋白质 Western Blot 低成本快速半干转印方法

随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验时

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