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探针的纯化

某些标记探针必须经纯化后方可使用。这是因为在探针标记过程中,反应液中仍存在一些未被结合到探针中去的剩余dNTP等小分子。 为将掺入并结合到cDNA,cRNA和标记寡核苷酸与游离的标

miRNA在阿尔茨海默病中的作用及其治疗前景

MicroRNAs(miRNAs)是短的内源性非编码RNA,在转录后水平调控基因表达与目标mRNA的碱基配对。在多种疾病,包括神经退行性疾病中观察到了miRNA表达谱的改变。 多项研究报告表明, 与健

细胞中mRNA原位杂交技术

原位杂交组化( ISHH )属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交

RNA酶A的小鼠细胞治疗

一、RNA酶A的小鼠细胞治疗介绍 RNA酶A透其次是免疫细胞治疗是一种方法,它允许显示的本地化涉及到细胞的蛋白质的RNA酶敏感的结构。这项技术是高度依赖所使用的RNA酶A的质量在我们的

真核细胞总RNA的提取与鉴定

【原理】 RNA的制备与分析对于了解基因表达在转录水平上的调节是必不可少的,也是最常使用的通过cDNA途径分析细胞基因表达的前提。通常一个典型的哺乳动物细胞约含10-5μg RNA,但其

双萤光素酶报告基因检测 (miRNA靶基因验证)实验

萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双报告基因则

核酸的抽提---mRNA的分离技巧

与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA 中分离mRNA dmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文

miRNA检测

一、miRNA简介 小 RNA是 19~28 nt 的调控RNA分子,主要包括微 RNA(micro RNA,miRNA)和小干涉RNA(short interfering RNA,siRNA)两类,其中的miRNAs成为继 siRNAs之后新的研究热点之一,名列2002年和2003年

miRNA的功能分析策略

【摘要】 在发育或分化的不同阶段以及疾病模型中,利用miRNA特异的芯片能绘制出细胞和组织的miRNA表达谱,这能够揭示出参与了这些进程的特定miRNA。miRNA的过表达和沉默,则是一种有

植物组织mRNA提取

mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA 3‘末端含有Poly(A+)的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下

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