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代谢组学∣如何得到真正的高质量数据?

代谢组学研究中,高通量数据批次内和批次间存在的非生物误差对分析结果有不可忽视的影响。

细胞中mRNA原位杂交技术

原位杂交组化(ISHH)属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。

探针的选择与标记

1.DNA 和 RNA 探针 其原理是克隆一段特异的 DNA 或 RNA 片段,装载到相应的质粒中。经过质粒扩增,酶解和纯化等步骤,就可以得到大量的 DNA 和 RNA 片段。更好的解决办法是直接购买纯化

质粒的制备、提取(一)

背景(1): 质粒是一种双链共价闭合的环状DNA,是染色体以外的稳定遗传因子。已经在细菌、真菌以及部分动植物细胞中发现质粒,以细菌中存在质粒最为普遍。质粒的制备与提取是

杂交和显色

1 、将加入探针的杂交液先于 50 ℃预热,均匀涂于切片表面,加上硅化盖玻片,放于湿盒中, 50 ℃孵育 12-16h 。 2 、 1 ×SSC (含 50% 甲酰胺), 50 ℃洗涤 2 次,每次 10min 。 3 、 2 ×SSC

DNA定量测定-Feulgen反应

实验背景与原理: DNA是主要的遗传物质,集中于染色体上。在真核细胞中DNA主要存在于细胞核中,在线粒体和叶绿体中也有少量分布。DNA的基本组成单位是脱氧核糖核酸,它由脱氧核糖

circRNA研究最近有哪些新进展?

circRNA(Circular RNAs,环形RNA分子)已经被验证为一种新的单链RNA,是一类不具有5' 末端帽子和3' 末端poly(A)尾巴,以共价键形成环形结构的非编码RNA分子,广泛在哺乳动物组织中表达,具有

质粒的制备、提取

克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制,明了其利用价值和途径。质粒包括基因过表达质粒、干扰质粒和启动子质粒等等多种类型,主要的差别

PH探针染色这4点要注意!

BCECF AM是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF AM即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein,acetoxymethyl ester,本BCECF AM (pH荧光探针)是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为

启动子质粒

一、 操作前准备 1. 仪器设备 PCR 仪、 37℃ 恒温培养箱、 37℃ 恒温摇床、水浴锅、超净工作台、高速离心机等等。 2. 试剂 过表达载体质粒( pGL3-Basic 等)、限制性内切酶、胶回收试剂

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