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启动子质粒(十一)

三、 质粒提取 8、 将吸附柱放入收集管内,离心得到的上清转移至吸附柱,室温, 15000rpm ,高速离心 30s 。 9、 弃废液,将吸附柱放入收集管,加入 700ul WB 溶液到吸附柱中, 15000rpm ,

启动子质粒(九)

三、 质粒提取 (一) 摇菌培养 1. 将鉴定测序正确的克隆菌液涂在 LB 固体平板。 2. 置于 37 ℃恒温培养箱,培养 12-17h ,待长出菌落。 3. 灭菌 15ml 离心管内加入 5ml 含抗生素的 LB 液体培

启动子质粒(八)

二、 菌落制备主要环节 (三) 连接 将回收的 PCR 产物连接入 pGL3-Basic 载体中,反应体系如下: T4 连接酶 1uL 5×buffer 1uL 酶切质粒( 50ng ) _ul 酶切 DNA 片段( 100ng ) _uL DDW 20uL * 16℃连接

基因芯片技术(八)

七 结果的分析 样品在被测定前,首先要经过消化,使待测组织细胞中的 DNA 或 RNA 释放出来,在经过适当的扩增后,以荧光标记物标记,放入基因芯片自动孵育装置( Fluidics Station )中

基因芯片技术(七)

2. . 生物素标记方法中的杂交信号探测 以生物素( biotin )标记样品的方法由来已久,通常都要联合使用其它大分子与抗生物素的结合物(如结合化学发光底物酶、荧光素等),再利用

基因芯片技术(六)

(4) 光纤传感器 有的研究者将 DNA 芯片直接做在光纤维束的切面上(远端),光纤维束的另一端(近端)经特制的耦合装置耦合到荧光显微镜中。光纤维束由 7 根单模光纤组成。每根

基因芯片技术(四)

(2) 激光扫描共焦显微镜 激光扫描共焦显微镜与激光扫描荧光显微镜结构非常相似,但是由于采用了共焦技术因而更具优越性。这种方法可以在荧光标记分子与 DNA 芯片杂交的同时进行杂

基因芯片技术(三)

(1) 激光扫描荧光显微镜 探测装置比较典型。方法是将杂交后的芯片经处理后固定在计算机控制的二维传动平台上,并将一物镜置于其上方,由氩离子激光器产生激发光经滤波后通过

基因芯片技术(二)

由于所使用的标记物不同,因而相应的探测方法也各具特色。大多数研究者使用荧光标记物,也有一些研究者使用生物素标记,联合抗生物素结合物检测 DNA 化学发光。通过检测标记信

基因芯片技术(一)

基因芯片检测原理 杂交信号的检测是 DNA 芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法,如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、

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