中性粒细胞吞噬功能测定小鼠巨噬细胞吞噬功能测定人巨噬细胞吞噬功能测定

实验材料       

中性粒细胞

试剂、试剂盒     

NBT盐水PBS硝基蓝四氮唑肝素甲醇沙黄水

仪器、耗材     

试管毛细滴管玻片培养箱显微镜

实验步骤     

一、试管法

肝素抗凝血0.1 ml 滴于小试管底部，再加入等量NBT应用液

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37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟

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摇匀，用毛细管取一滴放于玻片一端，做血涂片

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立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟

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PBS冲洗、自然干燥、油镜检测

二、微量法

取硅油处理的1 mm×75 mm 的毛细管取末梢血至30 mm 处

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立即吹入硅油处理的凹玻片中，与1/30量的0.05%肝素溶液混合

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加等量的1 g/L NBT，轻轻摇动混合，湿盒内，37℃，室温15分钟

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用毛细管吸去表层上清液，用硅油处理的毛细管吹数次混匀

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吸出少许制成血片，空气干燥，沙黄水溶液染色，油镜观察

三、结果

1. 血片中有10%以上的中性粒细胞的胞质中有蓝紫或蓝黑颗粒沉着，其沉着颗粒形状大小不一，有的呈大块状，有的呈点状或放射状。

2. 注意事项

NBT配制一定要完全溶解，滤液要呈透明的淡黄色，储存于棕色瓶中，NBT应用液应于用前配制。血涂片要求推出尾部，不可过厚或过薄。血液与NBT要充分混合，保温时间不能过长。   

此文转载：丁香通