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氧化应激miRNA荧光素酶报告载体集
 氧化应激由活性氧(ROS)的生成和移动失衡引起的。活性氧主要通过转录水平的基因表达引起广泛响应,如细胞增值、生长停滞或凋亡。最近研究表明,miRNA的转录后调节也有助于生理过程。现已有多种氧化应激相关的miRNAs被确定。
        Signosis已开发氧化应激miRNA荧光素酶报告载体集,包含miR-200a, miR-141, miR-125b, miR-30b, miR-320, miR-144, miR-27b和Negative control,以促进氧化应激的研究。

A.产品优势
         功能分析
——转染细胞后,可监测细胞内miRNA的表达;
         定量分析——miRNA的表达活性通过荧光素酶基因的表达来测定;
         全面高效——一次实验监测7种miRNA在细胞内的表达。

B.技术原理   
        一组miRNA互补序列分别插入在荧光素酶报告基因3’ UTR构建成一组miRNA荧光素酶报告载体。当miRNA与3’ UTR的互补序列结合后,抑制荧光素酶报告基因的表达,导致荧光素酶活性降低。通过比较两个样本中荧光素酶的活性,可以定量测定miRNA表达的升高和降低。
将靶基因大约1kb的3' UTR作为荧光素酶报告基因的3' UTR插入下游构建载体。当一个miRNA表达并结合到3' UTR,则抑制荧光素酶报告基因表达。因此,miRNA对特定位点的调控作用可通过荧光素酶的活性进行监测。通过比较两个样本荧光素酶的活性来分析miRNA的调控作用。

C.载体结构图
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