【实验目的】

1. 了解由于体循环静脉压增高致水肿的机制及临床表现和肺循环静脉压增高致水肿的机制及临床表现。

2. 了解不同类型的水肿在治疗上有什么不同。

【实验原理】

水肿是临床上常见的一种病理过程，其发病机制包括：①血管内外液体交换失平衡，致使组织液生成大于回流；②体内外液体交换失平衡致使钠水潴留。前者是由于毛细血管流体静压增高、血浆胶体渗透压下降、微血管（包括毛细血管和微静脉壁）通透性增加以及淋巴回流受阻等因素所致。

【实验对象】

家兔，2～2.5kg以上。

【试剂与器材】

1. 一般器械  家兔手术台，哺乳动物手术器械一套，注射器（1ml、2ml、5ml、10ml），纱布，听诊器，输液装置等。

2. 仪器设备  人工呼吸机， BL-410生物信号采集系统，压力换能器、张力换能器，动、静脉插管，三通管，导尿管等。

3. 药品  20%乌拉坦，0.2%肝素生理盐水，生理盐水，蒸馏水，肾上腺素注射液，洋地黄注射液，速尿注射液等。

【观察指标】

呼吸频率和深度、血压、脉压差、中心静脉压、心率、心音。

【实验方法与步骤】

1. 动物的麻醉与手术

（1）麻醉：家兔称重后，用20%乌拉坦（3~5ml /kg 体重）由耳缘静脉缓慢注射。注射期间注意观察动物肌张力、呼吸频率和角膜反射的变化，防止麻醉过深。麻醉后动物仰卧固定在家兔手术台上。

（2）手术

①分离颈部气管和气管插管：颈部剪毛，沿甲状软骨下正中切开皮肤6cm，分离皮下组织和浅层肌肉后，沿纵行的气管前肌和斜行的胸锁乳突肌间钝性分离，将胸锁乳突肌向外侧分开，即可见到深层的气管和旁边的颈动脉，将气管分离出（注意不要损伤气管壁两侧的血管），进行倒“T”形切口，然后将气管插管插入并固定好。

②血管插管：分离左侧颈总动脉和右侧颈外静脉。插入连接有压力换能器的动脉插管（内有肝素），并固定好，用于记录血压。从右侧颈外静脉插入5～6cm长的静脉导管，导管用三通管连接中心静脉压测压计和输液装置。不测压时，将导管与输液装置连通，缓慢输入生理盐水（5～10滴/min），保持导管通畅。

③尿道插管：将导尿管头端涂上少量液体石蜡后，从尿道口插入，见尿流出后即可，插入长度约为10~12cm 。

手术完成后，让动物安静5min，调整各记录装置，描记动脉血压和正常呼吸，测记各项指标对照值。用听诊器听心音和呼吸音。

2. 水肿的形成与利尿药的作用

（1）开胸：剪去右侧胸壁被毛，沿胸骨右缘作6~7cm的切口，钝性分离胸壁肌肉，暴露7、8、9肋骨。用两把大号直止血钳紧靠胸骨右缘平行地自第10与9肋间隙插入，延伸到第7与6肋间扣死止血钳，用手术刀或粗剪剪断所夹肋骨。

（2）将人工呼吸机连接到气管插管上，打开呼吸机开关，调节呼吸机使呼吸比=1.2∶1；呼吸频率为23/min；潮气量为51（潮气量的调节以动物胸腹部有轻度起伏即可）。

（3）阻碍下腔静脉回流：打开胸腔，找到下腔静脉（心尖部下面发黑、较粗的血管），用套有橡皮的弯止血钳夹住下腔静脉大部约2/3。

（4）快速输液（以180~200滴/min），随时观察各项指标的变化，当输入约250～300ml生理盐水，有明显的肝淤血和腹水以及血压也开始进行性下降时，开始进行抢救。

（5）分组：一组松开夹下腔静脉的止血钳并停止输液，选用速尿注射液进行救治（1%速尿1~1.5ml/kg 体重）；另一组不松开止血钳，给予速尿注射液（剂量同前组）；再一组是松开夹下腔静脉的止血钳，但不给利尿药物。

3. 急性肺水肿

（1）输入生理盐水（输入总量按180ml/kg，输液速度为180~200滴/min），待滴注接近完毕时立即向输液器滴管中加入肾上腺素（按0.45mg/kg），继续输液。

（2）密切观察呼吸改变（呼吸变快或变慢或变粗，有无湿啰音）和气管内是否有粉红色泡沫液体流出，当证明肺水肿出现时，血压也已下降到40mmHg以下时，夹住气管，处死动物。

（3）对照组：实验步骤与实验组不同之处是不加入肾上腺素，液体输到量即停止（180ml/kg）。其余同对照组。                                                   

4. 动物解剖

（1）下腔静脉阻塞的非治疗组动物死亡或抢救组完成实验后，挤压动物胸壁，观察气管内有无分泌物溢出，并注意其性状。剖开胸、腹腔（注意不要损伤脏器和大血管），观察有无胸水、腹水及其量；观察心脏各腔体积；肺脏外观和切面观；肠系膜血管充盈情况，肠壁有无水肿，肝脏体积和外观情况。最后剪破腔静脉，让血流出，观察此时肝脏、肾脏和心腔体积的变化。

（2）急性肺水肿组（实验组和对照组），打开胸腔，用线在气管分叉处结扎以防止肺水肿液流出，在结扎处以上切断气管，小心将心脏及其血管分离（勿损伤肺），把肺取出，用滤纸吸去肺表面的水分后称取肺重，计算肺系数，然后肉眼观察肺大体改变。并切开肺，观察切面的改变，注意有无泡沫液体流出。        

                                                     肺重量（g）

（3）肺系数的计算公式：  肺系数= ——————

                                                      体重(kg)

【注意事项】                            

1. 气管插管之前，最好检查一下气管内有无出血或分泌物，如有应先将出血或分泌物清理或抽吸干净，再插管，否则容易在气管内阻塞而影响实验指标的观察。

2. 插管的同时即可连接人工呼吸机，并开机（尤其是开胸后胸膜损伤引起气胸）。

3. 夹闭下腔静脉时一定要边观察血压边夹闭，当血压有明显下降，而且舒张压下降较明显时即可夹死止血钳，观察血压是否有回升，如有回升说明假定范围还可以，如血压没有回升，仍在快速下降，则说明夹闭的范围太大。需松开止血钳重新夹闭，否则下肢水肿还未出现动物就发生死亡。

4. 实验组、对照组或治疗组的输液速度应基本一致，输液不要太快，以控制在180~200滴/min为宜。

5. 实验性肺水肿模型复制时注射肾上腺素的量要控制好，最好从莫非氏管内加入，以免引起呼吸抑制或呼吸暂停。

6. 解剖取肺时，注意勿损伤肺表面和挤压肺组织，以防止水肿液流出，影响肺系数值。