【动物实验】-前列腺癌免疫人源化小鼠模型的构建及鉴定
发布人:管理员 浏览次数: 发布时间:2021-08-04
目的:构建人源化免疫系统小鼠模型,并将其移植到人前列腺癌细胞系中,用于前列腺癌免疫治疗药物的研究。
方法:采用Ficoll密度梯度离心,从新鲜的人外周血中分离出单个核细胞(外周血单核细胞,PBMC),通过尾静脉将NPG小鼠注射到人体免疫系统小鼠模型中。注射后三、四、五、六周,尾对接采集小鼠外周血,流式细胞仪监测小鼠外周血中人CD45++CD3+T细胞的动态变化水平。 ..注射后三周,小鼠皮下移植 1×10' 前列腺癌 2R1 细胞,每周监测两次肿瘤生长。当肿瘤长到约 1000 mm2 时,对小鼠实施安乐死。采用流式细胞术、免疫组化、HE染色等方法分析人源化小鼠外周血、脾脏和肿瘤组织中人免疫细胞的浸润情况。
结果:在模型小鼠中,移植人 PBMC 后 3-6 周外周血中检测到高水平的 CD45 + CD3 + T 细胞。在第 6 周处死小鼠。 HE染色和免疫组化染色结果显示,模型小鼠脾脏和肿瘤组织有人CD4+和CD8+T细胞浸润。
结论:我们已经成功构建了前列腺癌免疫的人源化小鼠模型。外周血、脾脏、前列腺癌肿瘤组织有高水平的人源性T细胞浸润,这是建立良好的前列腺癌免疫治疗诊所的下一步。前一种模式奠定了基础。
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