细胞凝集反应与细胞膜的渗透性
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-02-28
实验的原理：
（一）细胞凝集反应
细胞膜是由脂类双分子层镶嵌蛋白质构成的单位膜，而脂类和蛋白质又与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，具有使细胞凝集、血型鉴定、促进淋巴细胞分裂、防害抗虫等作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被的寡糖链相连接，起到“桥”的作用。
（二）细胞膜的渗透性
细胞膜是细胞与环境之间进行物质与能量交换的一种选择性通透屏障，可选择性地控制不同物质进出细胞，各种物质跨膜运输的方式是不同的，物质的通透性是由物质本身属性和膜的结构性质（如脂溶性、分子大小、所带电荷等）共同决定的；另外物质穿膜的通透性还要受到细胞生理状态和环境条件（如麻醉剂、热、辐射、pH值、盐不平衡等）的影响。渗入红细胞内的物质，增加了细胞内的渗透压，使细胞外的水分进入红细胞，细胞膨胀破裂，称为溶血。由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。
实验用品
1.器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架
2.材料: 土豆块茎
3.试剂: 2%鸭血红细胞、PBS缓冲液、土豆、0.17mol/L氯化钠、0.32mol/L乙醇等试剂
实验方法
(一) 细胞凝集反应
1 2%鸭血红细胞悬液制备
新鲜鸭血加ACD抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000 r/min，离心5min，按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液．
2 土豆凝集素制备
土豆2克，加10 ml PBS缓冲液，浸泡2h.
3 细胞凝集反应
土豆凝集素1滴
2%鸭血红细胞液 1滴
载玻片上混匀，静置200min，镜检．
4 对照
PBS 1滴
2%鸭血红细胞液1滴
（二）细胞膜的渗透性
1 低渗溶液
试管一支：
鸭血红细胞液1ml
ddH2O 10ml
轻摇混匀，观察颜色变化，若有溶血，记下自加入鸭血到溶液透明澄清的时间（注意结合镜检）．
2 等渗溶液
0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L硫酸铵、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮等８种溶液进行同样实验，步骤同上．
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