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动物组织培养准备技术之清洗与灭菌(1)

(一)使用过的玻璃器皿的清洗

  1.使用过的培养用品应立即浸入清水,避免干涸难洗。

  2.用洗涤剂清洗玻璃器皿,自来水清洗数遍。倒置自然干燥。

  3.浸入酸性洗液过夜。将玻璃器皿浸泡2-4h后便可冲洗;当洗液使用时间过长,颜色由黑红色变成黑绿色甚至墨绿色时,应适当延长浸泡时间。当酸性洗液转变成绿色时,应重新配置洗液。浸泡时应使瓶内的所有玻璃表面都接触到洗液,勿留气泡或死角。没有浸泡干净的玻璃器皿,可能会影响细胞的生长状态或影响显微摄像的效果。

  4.培养用品从酸性洗涤液中捞出后用自来水冲洗10-15次,去除残余酸液,蒸馏水涮洗3次或浸泡过夜,倒置烘干。

  5.包装:用牛皮纸或一般纸将培养器皿包好。培养瓶和培养用瓶只需包裹封住瓶口即可。

 

(二)胶塞的处理

  1.新胶塞应先用清水清洗之后再用0.2%NaOH煮沸10-20min

  2.自来水清洗10次。

  3.1%HCl浸泡30min

  4.自来水清洗10次,蒸馏水涮洗3次。晾干后包装,高压灭菌。(旧胶塞不必用酸碱处理,可直接用洗涤剂煮沸和清洗数次,过蒸馏水,晾干,包装,高压灭菌,烘干后即可使用。)

 

(三)常用洗液的配置

  1.按照表1中提供的数据,称取重铬酸钾,于适当体积大小的玻璃烧杯中,加入表格中提示的蒸馏水,搅拌。

                                                                                                                                                                          1 常用洗液配方

成分

强酸洗液

次强酸洗液

重铬酸钾

63g

3125g

120g

6000g

浓硫酸

1000ml

50000ml

200ml

10000ml

蒸馏水

200ml

10000ml

1000ml

50000ml

 

  2.加热表1中的液体,并用玻璃棒不断搅拌,待沸腾时重铬酸钾即可充分溶解。

  3.戴防酸手套和眼镜,并穿戴好耐酸衣裤和鞋子。小心地将已溶解上述液体倒入一干净无水的陶瓷材料的洗涤酸缸或其他耐酸材料的酸缸中。

  4.小心地将硫酸沿酸缸内壁缓慢地加入以上溶液中,边加边不断慢慢搅拌。(小心酸溅出)

  5.正常使用情况下,酸性洗液半年左右配置一次。


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