虽然 TriumX-100 是从鼠肝质膜溶解胰岛素受体的一种良好的去垢剂，但它未必适合其他膜蛋白的溶解。这里，介绍一种筛选去垢剂的策略以确定它是否适于溶解某一待分离的膜蛋白。

实验步骤  

操作程序

1) 将膜制备物悬浮于所选的缓冲系统（如，磷酸缓冲液或 HEPES 缓冲液）中。缓冲液浓度应为 50 mmol/L,pH 应接近该缓冲液的 pKa。蛋白终浓度应为约 10 mg/ml。将此膜悬液保存于 4°C。

2) 将被试的各去垢剂配制成 10%(100 mg/ml) 的储液，再用缓冲液将各去垢剂储液稀释成 0.2%、1%、2% 和 6%。

注：1. 毛地黄阜苷只能溶至 4%。2. Boehringer Mannheim 公司有去垢剂试剂盒出售，内中包括有常用于分析和纯化膜蛋白的 9 种非离子型和 3 种兼性离子型去垢剂的试样。

3) 等体积的备去垢剂溶液（得自步骤 2) 与膜制备物的等分试样（得自步骤 1) 混合。在每一管中，膜蛋白的终浓度为 5 mg/ml，去垢剂的终浓度分别为 0.1%、0.5%、1%、3% 和 5%。再配制一份样品，用不含去垢剂的缓冲液稀释。这样，即可得到试管内的去垢剂与蛋白质之比（即 mg 去垢剂/mg 蛋白）为 0、0.2、1、2、6 和 10 的一个系列。

4) 混合物于 4°C 下搅拌混合 1 h。

注：应避免起泡沫，因为这会使蛋白质变性。

5) 混合物于 4°C 下 100000 g 离心 1 h。

6) 将上清移至洁净的试管中。各沉淀物分别重悬于等体积的缓冲液中。

7) 分别测定各上清及沉淀中的蛋白质活性。

注：比较各上清及沉淀中的蛋白质活性，观察随着去垢剂浓度的增加，该去垢剂是否能将蛋白质从膜上溶下来。应将蛋白质活性对去垢剂-蛋白质比作图。

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