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【动物实验】-谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:讨论谷氨酰胺结合脐血间充质干细胞(MSCs)移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中作用。

办法:体外复苏并培育脐血间充质干细胞移植前备用,察看CM-DiI荧光标志后脐血间充质干细胞的去向。80只SD大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注损伤组,谷氨酰胺组,MSCs移植组及结合组每组各15只。对照组采用生理盐水灌肠,损伤组采用TNB(S乙醇稀释)灌肠,在TNBS建模后1 h,谷氨酰胺组于尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg、MSCs移植组于尾静脉输入1×1010/L脐血间充质干细胞悬液,结合组尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg+脐血间充质干细胞悬液1×1010/L。经过ELISA法检测各组大鼠血清中肠脂肪酸分离蛋白(IFABP)、白介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;各组于再灌注1 h、3 h后检测肠组织含水率;经过RT-PCR、Western blot察看大鼠肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB、Bcl-2在谷氨酰胺结合MSCs移植后的mRNA和蛋白的表达状况。

结果:经过荧光示踪法察看到移植的MSCs细胞散布于肠粘膜淋巴组织内和腺上皮细胞间,标明MSCs可能参与了肠缺血再灌注损伤的修复过程。各组大鼠血清中SOD、IFABP、IL-6的含质变化比拟,损伤组血清中IFABP、IL-6的含量较对照组显著增加,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及结合组与之比拟,则显著减少,结合组减少更为明显,损伤组血清中SOD的含量较对照组显著减少,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及结合组与之比拟,则显著增高,结合组增高更为明显(P<0.05)。再灌注1 3="" p="">0.05)。与对照组比拟,损伤组肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05),而谷氨酰胺组、MSCs移植组及结合组与之比拟,caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显下调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05),谷氨酰胺组及mscs移植组之间无统计学差别(p>0.05),但两组与结合组比拟,差别明显(P<0.05)。

结论:谷氨酰胺组及MSCs移植后,明显减轻了大鼠肠缺血再灌注损伤水平,其可能经过抑止caspase-3、NF-kB表达和促进Bcl-2表达减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。

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