目的:应用OPG(osteoprotegerin)/RANK(receptor activator of NF-κB)/RANKL(receptor activator of NF-κB ligand)系统比拟研讨前肢畸形WHBE兔骨代谢特征。
办法:取WHBE兔、日本大耳白兔、前肢畸型WHBE兔各10只,分为3组,标志为HWR(healthy WHBE rabbit)、HJR(healthy Japanese rabbit)和FMWR(forelimb malformation WHBE rabbit)组。用X射线机所拍摄X-线片察看各组兔前肢尺桡部外形并测定均匀灰度值;经过骨组织石蜡切片HE染色对前肢骨组织停止微观形态剖析;采用荧光定量PCR法检测OPG、RANKL基因在肝脏中表达;采用酶联免疫法和免疫组化法分别测定OPG/RANK/RANKL蛋白在血清和骨组织中的表达。
结果:与HWR和HJR组比拟,FMWR组兔前肢尺桡部呈异常弯曲状,骨皮质明显变薄,X-线片所示灰度值显著低于HWR组(P<0.05)。FMWR组兔在肝脏RANKL基因表达程度和RANKL/OPG mRNA比值(P<0.01),血清RANK、RANKL蛋白含量及RANKL/OPG比值(P<0.05,P<0.01),骨组织RANKL蛋白表达阳性指数及RANKL/OPG比值(P<0.05,P<0.01)等指标上均显著高于HWR组和HJR组。与HJR组比拟,HWR组兔肝脏OPG和RANKL基因表达程度显著进步(P<0.05,P<0.01)。
结论:前肢畸形WHBE兔存在骨质量降落、骨组织受损现象,RANKL/OPG比值明显升高,骨代谢紊乱是其骨骼发作畸形的主要缘由。与日本大耳白兔在RANKL基因表达程度上的种类差别可能是WHBE兔对前肢畸形易感的诱因。