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体外SUMO修饰实验(五)


5. SUMO化蛋白的检测

  (1)培养细胞,待细胞融合至90%左右。

  (2PBS洗涤细胞2次,0.25%胰酶消化细胞。

  (31000rpm,离心3-5min收集细胞。

  (4)PBS洗涤细胞2次。

  (5)1000rpm,离心3-5min,弃掉上清液。

  (6)加入50ul细胞裂解液,冰浴10min

  (7)4℃,12000g,离心15min

  (8)取上清液,检测蛋白浓度。

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