高 GC 含量片段的 PCR 扩增实验
试剂、试剂盒 甜菜碱 dNTP 溶液二甲基亚砜四甲基砜 Taq 酶和酶缓冲引物 仪器、耗材 PCR 仪 实验步骤 一、材料 1. 试剂 甜菜碱（ Sigma 公司） dNTP 溶液（含四种 dNTP, 每种 25 mmol/L) 二甲基亚
差示反转录PCR实验
差示反转录 PCR 也称为 mRNA 差异显示技术，它是将 mRNA 反转录技术与 PCR 技术二者相互结合发展起来的一种 RNA 指纹图谱技术，具有简便、灵敏、 RNA 用量少、效率高、可同时检测两种或
大片段的精确扩增实验
用 10 对不同的引物扩增约 5kb 的片段，模板 DNA 是一样的，反应体系是 50ul, 对照中未加模板，含有单一引物。对于循环数较多（ 25 〜 40) 的反应，一般应设置一个没有模板或单引物对照
B淋巴细胞膜表面免疫球蛋白（SmIg）的检查 直接免疫荧光法
一、实验原理 SmIg是B细胞的抗原识别受体，也是B细胞特异的表面标志，用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig抗体，在一定条件下与淋巴细胞混合，荧光素标记的抗Ig抗体
免疫组化难题集锦【一】
1、石蜡切片和冰冻切片的比较？ （ 1 ）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果
免疫组化难题集锦【二】
1、在什么情况下使用 TritonX-100 ？ （ 1 ） Triton X-100 化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织化学 (10um 厚切片 ) 和免疫细胞化学中一般用 Triton X-100 作为细胞通透剂
免疫组化难题集锦【三】
1、 DAB 显色时间如何把握？ （ 1 ） DAB 显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗； （ 2 ） DAB 显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的
免疫组化难题集锦【四】
1、苏木素复染时间的把握？ （ 1 ）苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况，一般数秒 - 数分钟。不过这个如果染色不理想可以补救的。即：染色深则分
免疫荧光实验方法中需要注意的环节
免疫荧光方法中的重要环节: 1、冰冻切片制备： 建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。
Western-Blot实验的总结
一、样品制备 1. 变性条件——SDS LB直接裂解 用常温或者高温预热过（预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化，但容易遗忘，LB久煮某些性质会改变）的1*SDSLB（或者略高1.5*）直
