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重叠延伸PCR

重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理 AFLP 也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测 DNA 多态性的一种 DNA 分子标记技术。但 AFLP 是通过 PCR 反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶

甲基化特异性PCR

DNA 甲基化是一种表观遗传修饰,它是由 DNA 甲基转移酶( DNAmethyl-transferase, Dnmt )催化 S- 腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,将胞嘧啶转变为 5- 甲基胞嘧啶( mC )的一种反应,在真核生物

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应 (polymerase chain reaction , PCR) 是一种模拟天然 DNA 复制过程,在体外扩增特异性 DNA (或 RNA )片段的新技术。本实验是将待检双链 DNA 经 94 ℃高温变性成单链作模板,然后加

降落PCR

降落 PCR ( touchdown PCR ),一种 PCR 技术,主要用于 PCR 的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得 PCR 难以进行,例如特异性不够易错配等。退火温度过高会使 PCR 效率过低,但退火温

多重 PCR 扩增实验

试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA 引物 仪器、耗材 热循环仪 实验步骤 一、材料 1. 酶和酶缓冲液 Taq 聚合酶 许多 Taq 聚合酶都可以用;作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多

多重 PCR 扩增实验

试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA 引物 仪器、耗材 热循环仪 实验步骤 一、材料 1. 酶和酶缓冲液 Taq 聚合酶 许多 Taq 聚合酶都可以用;作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多

免疫PCR系列三-基本实验步骤

主要程序 ( 1 )抗原 + 生物素化抗体→抗原 - 生物素化抗体复合物; ( 2 )加亲合素→抗原 - 生物素化抗体 - 亲合素复合物; ( 3 )加生物素化 DNA →抗原 - 生物素化抗体 - 亲合素

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素 [125I] 胰岛素(受体级)结合缓冲液 实验步骤 材料 [125I] 胰岛素(受体级)( DuPontNENNEX196) 猪胰岛素(如, Sigma Chemical Co,I3505) 牛血淸白蛋白( BS

用 dUTP 净化 PCR 产物的实验

试剂、试剂盒 dNTP 溶液 MgCl2 溶液 PCR 缓冲液引物尿嘧啶 -DNA- 糖基酶 Taq DNA 聚合酶 仪器、耗材 PCR 仪离心管 实验步骤 一、材料 1. 试剂 ( 1 ) dNTP 溶液(含有 dATP 、 dCTP 、 dGTP 和 dUTP ,

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