新生鼠处死及表皮细胞提取
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-06
分离表皮细胞，需要新生鼠的皮肤全层。
不知道有血会不会有影响。用乙醚试试？不会出血
方法一
一般用酒精擦拭全身以后，直接用剪刀断头处死，滴尽体内血，用棉球擦干净颈部血，然后大头针固定就好了，不到一分钟就行了，而且不会影响细胞的活力，也没有应激反应。
方法二
既然是要分离细胞要注意无菌操作
1、对乳鼠进行消毒：将乳鼠浸泡在75%的酒精中片刻，或用酒精擦拭乳鼠全身。
2、处死和放血：用无菌剪刀剪乳鼠的左腋下（相当于心脏的位置）彻底放血。
3、取材：取的表皮组织置无菌生理盐水或PBS液中清洗，再进行分细胞的处理。
方法三
1、将乳鼠浸泡在75%的酒精中浸泡5分钟。（基本上喝酒都喝晕了，还顺便消毒）
2、再新洁尔灭浸泡5分钟（乳鼠已经挂了，再次消毒）。
3、捞出来，从颈部做一切口，尾部及四肢一切口，腹部一切口（注意不要切开腹膜），然后一拉皮就下来了。取表皮干细胞就是这么取的，仅供参考！
方法四
1）、将表皮再次以0.25%胰酶37度下振荡消化8min左右，加入与胰酶等量的含10% FBS的培养基终止消化后，充分吹打。
2）、1000rpm/min离心10分钟，弃去上清液及已消化的表皮。
3）、加入ESCs培养基，充分吹打，制成单细胞悬液。
此文转载来源：丁香通
不知道有血会不会有影响。用乙醚试试？不会出血
方法一
一般用酒精擦拭全身以后，直接用剪刀断头处死，滴尽体内血，用棉球擦干净颈部血，然后大头针固定就好了，不到一分钟就行了，而且不会影响细胞的活力，也没有应激反应。
方法二
既然是要分离细胞要注意无菌操作
1、对乳鼠进行消毒：将乳鼠浸泡在75%的酒精中片刻，或用酒精擦拭乳鼠全身。
2、处死和放血：用无菌剪刀剪乳鼠的左腋下（相当于心脏的位置）彻底放血。
3、取材：取的表皮组织置无菌生理盐水或PBS液中清洗，再进行分细胞的处理。
方法三
1、将乳鼠浸泡在75%的酒精中浸泡5分钟。（基本上喝酒都喝晕了，还顺便消毒）
2、再新洁尔灭浸泡5分钟（乳鼠已经挂了，再次消毒）。
3、捞出来，从颈部做一切口，尾部及四肢一切口，腹部一切口（注意不要切开腹膜），然后一拉皮就下来了。取表皮干细胞就是这么取的，仅供参考！
方法四
1）、将表皮再次以0.25%胰酶37度下振荡消化8min左右，加入与胰酶等量的含10% FBS的培养基终止消化后，充分吹打。
2）、1000rpm/min离心10分钟，弃去上清液及已消化的表皮。
3）、加入ESCs培养基，充分吹打，制成单细胞悬液。
此文转载来源：丁香通
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