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体外SUMO修饰实验五

5. SUMO化蛋白的检测 (1 )培养细胞,待细胞融合至 90% 左右。 ( 2 ) PBS 洗涤细胞 2 次, 0.25% 胰酶消化细胞。 ( 3 ) 1000rpm ,离心 3-5min 收集细胞。 (4) PBS 洗涤细胞 2 次。 (5) 1

凝胶迁移或电泳迁移率实验

凝胶迁移或电泳迁移率实验( EMSA )是一种研究 DNA 结合蛋白和其相关的 DNA 结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。通常将纯化的蛋白或细胞粗提液和标记的 DNA 探针一同保

NFkB滤板法检测试剂

核因子-kB(NF-kB)是一种转录因子,调控参与免疫反应、凋亡和细胞周期的基因表达。NF-kB可以由各种刺激物激活,这些刺激物有细胞因子、T、B细胞有丝分裂原、病毒蛋白、压力诱导物。刺激导

单细胞实时荧光定量RT-PCR检测试剂

为了便于单细胞基因表达研究,Signosis开发出一种基于SYBR green的单细胞实时荧光定量RT-PCR检测试剂,该试剂可以使用细胞裂解液直接检测基因表达水平,无需RNA制备过程。这个试剂盒提供了一种

免疫沉淀-蛋白印迹法

2.1. Material and reagents Duolbecco’s phosphate buffered saline (PBS), Medium 199 with Earle’s salts and 25mM HEPES, collagenase Type II (from Clostridum histolyticum), antibiotic/antimyotic solutuion (containing 10,000U penicillin, 10,000µg st

蛋白质染色实验

凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷,而银染法具有相当高的灵敏度,能用于检出更少量的蛋白质。

重组大肠杆菌目的蛋白的表达蛋白电泳

第1次 菌体超声破壁、离心、包涵体复性、 装离子交换柱 第2次 测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次 浓缩、透析前、后样品测活、定蛋白 装分子筛柱 第

蛋白质检测

蛋白印迹法 五 抗原 - 抗体反应 4 二抗的处理 (1) 常用二抗: HRP 偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗,但不够灵敏。 (2) 二抗稀释液: PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封闭液等

蛋白质免疫印迹(Western Blot )

蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用

蛋白质测序

蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.Sanger测定了胰岛素的一级结构以来,现在已经知道约十万个不同蛋白质的一级结构。

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