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分子提取方法(十四)

分子提取方法 DNA提取 (二)从各种组织中提取DNA 3.DNA定量 (1)超微量核酸定量仪直接测定核酸浓度:同RNA定量。 (2)紫外分光光度计间接测定核酸浓度:同RNA定量。 (3)嗅化乙锭

分子提取方法(十三)

DNA提取 (二)从各种组织中提取DNA 2.从血液中提取DNA(可以用新鲜血、贮藏血、运送血、也用于羊水中提取DNA) (1)无菌采血8-20ml,加入到含有柠檬酸试管中,也可用于2%EDTA抗凝。

分子提取方法(十二)

DNA 提取 (二) 从各种组织中提取 DNA 1. 从实体组织中提取 DNA (新鲜组织或冰冻组织) (1) 无菌条件下,组织切片适当小块,液氮中冷冻保存。 (2) 取出组织,置乳钵中迅速磨成粉

分子提取方法(十一)

DNA提取 (一)培养细胞DNA提取 3、破碎细胞、释放核酸(二) (10)上清液移至一个新的1.5ml离心管中。 (11)重复(7)~(10)2~3次,直至离心后液面间没有蛋白。 (12)加入250ul氯仿

分子提取方法(十)

DNA提取 (一)培养细胞DNA提取 2、试剂 PBS缓冲液、细胞裂解液、蛋白酶K溶液、tris饱和酚、氯仿、TE缓冲液、RNaseA 、3M醋酸钠(PH 7.4)、乙醇等。 3、破碎细胞、释放核酸(一) (1)取

分子提取方法(九)

DNA 提取 (一)培养细胞 DNA 提取 1、 原理 细胞裂解液中含有去污剂十二烷基硫酸钠( SDS ),溶解细胞膜、核膜,破坏细胞并释放出来 DNA 。蛋白酶 K 是光谱蛋白酶,能在 SDS 和 EDTA 存

分子提取方法(八)

DNA 提取 (一)培养细胞 DNA 提取 1、 原理 细胞裂解液中含有去污剂十二烷基硫酸钠( SDS ),溶解细胞膜、核膜,破坏细胞并释放出来 DNA 。蛋白酶 K 是光谱蛋白酶,能在 SDS 和 EDTA 存

分子提取方法(七)

RNA 提取(一) 1) 取出 -80 ℃保存样品,室温,溶解。 2) 每 1ml Trizol 加 0.2ml 氯仿,强烈上下混匀,室温。静置 2-3min ,抽提 RNA 。 3) 用超速低温离心机 4 ℃, 15000rpm, 离心 15min 。

分子提取方法(六)

2 组织样品处理 (1) 实验动物组织用手术刀切下 1g 左右,放在冰生理盐水或 PBS 液中洗去血液,滤纸吸去组织表面的水分。 (2) 小剪刀剪碎组织,加入 1.0-1.5ml Trizol ,组织研磨器或

分子提取方法(五)

Trizol 提取总 RNA 1 细胞样品处理 ( 1 ) 6 孔细胞培养板或 35mm 培养皿培养的细胞待 70%-80% 融合。 *悬浮细胞时,离心上清液收集细胞。 (2) 彻底弃上清液,每孔加 0.5-1ml Trizol,混匀,室

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