核糖核酸酶保护测定（二）
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-06
1. 加入适当体积的RNA（<12 μl）+探头（<3 μl）。
尝试5和10μg 的RNA加600或800页高辛标记的探针。
2. 包括2-3的酵母RNA样品/探针使用。
3. 加入20 μl SOLN。 A到所有涡管（FV =30 μl）和自旋向下。
4. 孵育90-95℃，5分钟使之变性。冰降速。
5. 在42-45'C在干燥的孵化器或水浴孵育O / N。
6. 核糖核酸酶消化：稀SOLN。 R在SOLN。 Bx的1：100。每个样品中添加200 μl 。1：300稀释增加66.7 μl 以上的SOLN133.4 μl。 BX。Bx的单独以酵母RNA样品。
7. 涡的所有样本，然后降速。
8. 孵育在37℃长达30分钟。涡然后停止运转。
9. 添加300 μlSOLN。 DX。涡然后停止运转。
10. 储存于-20'C15分钟。
此文转载：丁香通
尝试5和10μg 的RNA加600或800页高辛标记的探针。
2. 包括2-3的酵母RNA样品/探针使用。
3. 加入20 μl SOLN。 A到所有涡管（FV =30 μl）和自旋向下。
4. 孵育90-95℃，5分钟使之变性。冰降速。
5. 在42-45'C在干燥的孵化器或水浴孵育O / N。
6. 核糖核酸酶消化：稀SOLN。 R在SOLN。 Bx的1：100。每个样品中添加200 μl 。1：300稀释增加66.7 μl 以上的SOLN133.4 μl。 BX。Bx的单独以酵母RNA样品。
7. 涡的所有样本，然后降速。
8. 孵育在37℃长达30分钟。涡然后停止运转。
9. 添加300 μlSOLN。 DX。涡然后停止运转。
10. 储存于-20'C15分钟。
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